Техника оттаивания спермы
Размораживание спермы производится следующим образом:
1. Поставить на стол перед источником света микроскоп, протереть зеркало. (Увеличение должно быть в 200 раз).
2. Навести освещение (освещение должно быть равномерное по всему полю зрения.
3. Навести освещение, подключить электрический столик или заправить столик «Морозова» водой с температурой 40 – 42 С и установить его на предметный столик так, чтобы поле зрения было равномерно освещено.
4. Взять предметное и покровное стекла, протереть стерильной марлевой салфеткой и положить на столик «Морозова».
5. Приготовить водяную баню с температурой 40 – 42 С (для определения температуры воды обязательно воспользоваться термометром; затем отмерить цитрат , вылить его в стерильный флакончик , закрыть резиновой пробкой и поместить в паровую баню.
6. Надеть защитные очки и перчатки.
7. Снять крышку с сосуда Дьюара и положить ее на табурет , вынуть пробку и положить ее на крышку , обработанным пинцетом достать мешочек со спермой (не выше горловины сосуда), извлечь пинцетом гранулу из мешочка и положить ее во флакон с подогретым концентратом , мешочек опустить в азот , закрыть сосуд Дьюара, снять очки и перчатки , взять флакончик с гранулой , вращательными движениями перемешать содержимое флакона (оттаивать гранулу в течении 5 – 8 сек.
8. Взять подогретое предметное стекло, нанести стеклянной палочкой каплю спермы , сверху положить покровное стекло и определить активность спермиев.
9. При помощи макро-винта опустить тубус до прикосновения объектива с покровным стеклом.
10. Посмотреть в окуляр, медленно подняв тубус вращением макровинта до появлениев спермиев в поле зрения, а при помощи микро-винта навести резкость. Сперма к использованию допускается с оценкой не ниже 3 баллов (т.е. не менее 30% спермиев должны иметь прямолинейное поступательное движение.
При наличии спермиев только с колебательными движениями сперму оценивают буквой К.
При наличии только манежного движения – буквой М.
Неподвижность всех спермиев обозначают – буквой Н (некроспермия).
В свежеполученной хорошей сперме быка 80 – 90 % спермиев двигается поступательно.
Одновременно с оценкой под микроскопом подвижности спермиев глазомерно определяют густоту спермы – степень насыщенности ее спермиями. При этом сперма может быть:
1. Густая – все поле зрения заполнено спермиями , обозначают буквой Г.
2. Средняя – между спермиями промежутки примерно равны длине спермиев , обозначают буквой С.
3. Редкая – между спермиями в поле зрения большие промежутки, обозн. буквой Р.
😱💋🐾